ResearchPad - 技术进展 https://www.researchpad.co Default RSS Feed en-us © 2020 Newgen KnowledgeWorks <![CDATA[微波消解-ICP-MS法测定肺癌患者体液和头发中的14种元素的含量]]> https://www.researchpad.co/article/5c052c3fd5eed0c4848a7cc8 体液和组织中的微量元素的含量是多种疾病的重要监测指标,对肺癌病人体液和头发中的微量元素进行分析,有助于肺癌的早期诊断及治疗效果评价。本研究旨在发展一种能够测定肺癌患者体液和毛发中Cr、Fe、Mn、Al、Cd、Cu、Zn、Ni、Se、Pb、Ca、Mg、Sr、P等14种微量元素的含量的方法。方法采用微波消解法对取自16例肺癌患者的48份样品进行消解,利用ICP-MS方法进行元素含量测定。结果利用GBW09101人发成分分析标准物质对所建方法的准确性进行了考察,结果表明,测得值与标准值之间不存在统计学差异。利用所建的方法分析了来自16例肺癌患者的48份样品,从中发现了若干规律。结论本方法适用于肺癌患者体液和毛发中微量元素的测定,对于肺癌的诊断和治疗具有一定的临床意义。 ]]> <![CDATA[在长载体中引入定点突变的方法]]> https://www.researchpad.co/article/5c052bf6d5eed0c4848a748b 体外基因定点突变是分子生物学实验的常用方法。然而,虽然目前已经报道了多种基因突变的方法,但对于在长的载体序列中引入突变,一般的方法并不太容易实现。方法本研究在我们前期报告的基因突变方法的基础上,描述了一种简单易操作的可在长序列中引入定点突变的方法。这个方法的基本实验程序是:①确定待突变区域,合成一对均含有Type IIs类限制性内切酶位点载体引物,并合成一对互补的突变单链;②在突变区域之外的合适位置上,选择一个桥点,并合成一对均含有Type IIs类的限制性内切酶位点的桥点引物;③利用载体引物序列和桥点引物序列做PCR反应,以扩增载体序列中突变区域外的序列;④利用相应的Type IIs类的限制性内切酶,对以上扩增产物进行酶切;⑤将酶切产物和两个突变单链复性成的突变双链连接,形成突变载体,并转化进受体菌作克隆鉴定。结果为证明我们所报告的方法的有效性,我们在长的载体中进行了测试,结果显示,不但实验操作简单易行,而且突变效率可达到90%以上。结论我们提供了一种有效的在长载体中进行定点突变的方法。 ]]> <![CDATA[在基因序列中高效引入多位点突变的方法]]> https://www.researchpad.co/article/5c052af5d5eed0c4848a5214 在基因序列中引入点突变是研究基因结构和功能及其相关性的重要手段。目前已有多种对基因序列进行突变的方法,然而,这些方法大多对单一位置的基因突变有效,而对在基因序列中引入多位点突变,还有待方法的进一步改进。为适应这一需要,本研究提供了一种高效的可在基因序列的多个位点引入突变的方法。方法该方法依赖于一种Type Ⅱs类的限制性内切酶,例如Esp 3I等。本研究所提供的方法中,针对每一个突变位点,合成一对含有突变点和所选择的Type Ⅱs类的限制性内切酶位点的引物,当需要引入多位点突变时,则利用邻近的两个突变位点的引物做PCR反应,多个位点的突变,就可以得到多个扩增片段,将这些片段用和引物上的限制性内切酶位点对应的酶进行反应,然后用连接反应将片段连接形成突变基因。结果本研究所提供的方法非常简便,主要实验步骤可以在一天之内完成。我们已经利用这种方法,在绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein, EGFP)和nm23基因中,引入3个或4个突变,突变效率几乎为100%。结论本研究所提供的方法可以成为研究基因功能的有用工具。 ]]> <![CDATA[全孔道(port-only)人工气胸下机器人辅助肺叶切除术]]> https://www.researchpad.co/article/Na8ce3e24-4484-48ac-bf98-6421d3becc15 达芬奇机器人手术操作系统目前在胸外科得到了广泛的应用,国内不同中心采用的建立通道方式及操作流程,不同辅助操作孔多采用小切口的方式。方法基于大量临床实践的基础上,我们在实践中总结国内、外经验,并结合国人体型特点,对机器人辅助肺叶切除术的切口及操作流程进行了改进并实践出一套更加简化易行的手术方法。结果全孔道(port-only)人工气胸下机器人辅助肺叶切除术在术中解剖安全性,止血效果和伤口美观性方面,都有进一步的提升。结论本研究对全孔道人工气胸机器人辅助肺叶切除的流程加以优化,以期为肺癌患者更好地服务。 ]]>